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影響細胞株凍存的因素
更新時間:2023-03-08   點擊次數(shù):1618次

你們細胞是怎么凍存的?求解!!!我的是4度冰箱放半小時,-20度冰箱半小時,然后轉移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1個月后,細胞復蘇就感覺狀態(tài)不太好了!!

做實驗前要先學會凍存,以備自己在后面的實驗中能保持同一來源、穩(wěn)定可靠的細胞,且可減少污染或其它不利影響。


影響凍存細胞活性的因素

1、細胞凍存保護劑:常用的有二甲基亞砜(DMSO)和甘油,常用的濃度為5%-10%(90%小牛血清)。DMSO對二倍體細胞的毒性較甘油小。

2、細胞懸液的凍結速度:慢凍時冰凍在細胞外形成,因此不致?lián)p害細胞。多數(shù)細胞以每分鐘下降1℃的速度,降至-20℃凍結。均可獲得滿意效果。

3、保存溫度:液氮罐,可達到-196℃,此時所有的物理化學活動均降至zui低限度,以保證細胞長期保存。

4、復蘇:急速融化復蘇可防止損害細胞。凍結細胞從液氮中取出后,應立即放入37℃~43℃的水浴中,30秒至一分鐘內(nèi)融化。

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